BioximiaForYou

UTASÍTÁSOK

egy reagenskészlet alkalmazásáról a fehérje kolorimetriás meghatározására vizeletben és cerebrospinális folyadékban pirogallol piros

A készlet tartalmaz:

200 ml (2 x 100 ml P + 2 x 2 ml kalibrátor)

500 ml (2 x 250 ml P + 2 x 5 ml kalibrátor)

A módszer alapelve

Amikor a fehérje kölcsönhatásba lép a pirogallol piros és

a nátrium-molibdát egy színes komplexet képez,

amelynek színintenzitása arányos a koncentrációval

Kit Tartalom

Reagens (P) - pirogallol piros oldat szukcinátban

felhasználásra kész puffer.

Kalibrátorok - alacsony kalibrációs fehérjeoldatok (0,20

g / l, a mikroproteinuria meghatározásához) és magas

(0,50 g / l, proteinuria meghatározására)

fehérje koncentrációja 70% albumint és 30%

globulin felhasználásra kész.

Tároló készlet - 2-8 ° C hőmérsékleten egy csomagban

a gyártó számára a teljes eltarthatósági időre.

A reagens és a kalibrátorok stabilitása

Megnyitás után a reagens 6 hónapig stabil, kalibrátorok - 3 hónap. szorosan zárt formában, 2-8 ° C hőmérsékleten, sötét helyen tárolva.

Normál értékek

  • vizelet - 0,120 g / l-ig (0,141 g / nap);
  • cerebrospinális folyadék (CSF) - 0,150-0,450 g / l.

Az analízishez szükséges minták

Vizelet, nem hemolizált CSF.

Előkészítés az elemzéshez

  1. A CSF-et és a vizeletet 10 percig centrifugáltuk 2700-4000 fordulat / perc sebességgel.
  2. Használjon tiszta, jól mosott csöveket az elemzéshez. A vizsgálati csövek elemzésre való alkalmasságának vizsgálata a reagens színváltozásának hiánya. Ha a reagens mintavétel nélkül kékre változik, a fehérje-meghatározás eredményeit túlbecsüljük; ezért először adja ki a reagenst, majd adjon hozzá vizeletet.
  3. A módszer beállításakor új küvettákat kell használni, mivel nem festik a reagenssel és a reakciómintával. Régi műanyag küvetta (zavaros, nem átlátszó) nem alkalmas mérésre. Használat előtt a használt küvettákat az alábbiak szerint kell kezelni: 10 percig hagyja a mosóoldatot (200 ml 5% -os hidrogén-peroxid-oldatot vagy 1 ml mosószert), majd öblítse le csapvízzel és desztillált vízzel legalább 10-szer. A készlet alkalmas biokémiai félautomata és automatikus analizátorok elemzésére.

Analízis Hullámhossz: 598 (578-620) nm; optikai út hossza: 10 mm; hőmérséklet: 18-25 ° C

A reagenseket és a kalibrátort szobahőmérsékleten kell tartani körülbelül 30 perccel az elemzés előtt.

1. eljárás (proteinuria meghatározás)

A mintákat keverjük, 10 percig szobahőmérsékleten (18-25 ° C) tartsuk. Mérjük meg a kísérleti (E) és a kalibrációs (EC) minták optikai sűrűségét a kontroll (üres) mintával szemben. A szín 1 órán át stabil.

MI AZ INTÉZKEDÉSRE VONATKOZNI AZ URINE SZULFOSALYKÍLI MÓDSZERBEN?

Hazánkban a Kingsbury F által először javasolt szulfosalicilsav (szulfosalicilsav) módszerrel alkalmazott turbidimetriás módszert elsősorban a vizeletben lévő fehérje koncentráció meghatározására használják. B. Ugyanakkor a fejlett országok laboratóriumai gyakorlatilag nem használják ezt a módszert, ezért a vizeletfehérje-analízis laboratóriumi minőségellenőrzése a variációs együttható csökkenését mutatja. Tehát 1993-ban a francia klinikai diagnosztikai laboratóriumok 60% -a végezte a vizeletfehérje koncentráció meghatározását kolorimetriás módszerrel pirogallol vörös festékkel (pirogallol módszer) és csak 10% -kal a szulfozicil-módszer alkalmazásával. A pirogallol módszeren alapuló húgyfehérje meghatározására szolgáló diagnosztikai készletek olyan jól ismert cégek, mint a Bayer D iagnostics, Beckman, Biodirect, Biocon Diagnostik, Bio-Rad Laboratories, Eurodiag, Kone, Merck, Randox, Serono, Sentinel CH, Sigma. Sajnos hazánkban gazdasági okokból és részben tapasztalathiány miatt a vizelet fehérje meghatározására szolgáló kolorimetriás módszerek még mindig nagyon kevések.

Felmerül a kérdés: mennyire indokolt a fejlett országok laboratóriumainak elutasítása az egyszerű és legfontosabb, olcsó módszer alkalmazásától. A kérdés tisztázása érdekében összehasonlítottuk a fehérje koncentrációjának meghatározását a vizeletben a két módszerrel: szulfosalicil [1] és pirogallol [2].

A fehérje koncentrációjának minden egyes módszerrel történő mérésére szolgáló eljárás a következő volt.

Reagensek: 3% szulfosalicilsav-oldat, 0,9% -os nátrium-klorid-oldat,

A „Diakon DS” által gyártott „Uni-Test - Total Protein” kit „kalibrátor (szérumalbumin kalibráló oldata, 0,9% nátrium-klorid-oldat, 0,9% és nátrium-azid, 0,095%)„ A / Az Unimed-ről.

Felszerelés: az SFB 2000 spektrofotométere, amelyet az OKB „Spectr” gyárt.

Mérési út: 0,5 ml szűrt vizeletet és 1,5 ml 3% -os szulfosalicilsavoldatot adtunk 1 cm-es optikai úthosszúságú kvarc küvettához, és kevertük. 10 perc elteltével az optikai sűrűséget 595 nm hullámhosszon spektrofotométerrel mértük egy üres mintával (küvettával 0,5 ml vizelettel és 1,5 ml 0,9% -os nátrium-klorid-oldattal). A fehérjekoncentráció számítását a kalibrációs ütemterv szerint végeztük. Megépítéséhez a humán szérumalbumin standard oldatának 0,9% -os nátrium-klorid-oldatban történő hígítása: 0,025; 0,05; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9 g / l. Minden előkészített oldat esetében a mérést ugyanúgy végeztük, mint a vizeletmintát. A kalibrációs grafikon az 1. ábrán látható.

Ábra. 1. Kalibrációs görbe a vizeletben lévő fehérje szulfosalicil módszerrel történő meghatározására.

A Biocon Diagnostik (Németország) által gyártott kereskedelmi készletet - a Fluitest USP - Protein-t, a vörös pirogallol-molibdát komplexen alapuló ultraérzékeny eljárást használtuk.

Reagensek: pirogallol piros, 0,06 mmol / l, nátrium-molibdát, 0,04 mmol / l, szukcinát puffer 50 mmol / l, pH 2,5, detergensek 2%; A „Diakon DS” által gyártott „Uni-Test - Total Protein” kit „kalibrátor (szérumalbumin kalibráló oldata, 0,9% nátrium-klorid-oldat, 0,9% és nátrium-azid, 0,095%)„ A / Az Unimed-ről. [3].

Felszerelés: StatFax 1904 Plus biokémiai fotométer („Awareness Technology inc.”, USA).

A leírt módszer kalibrációs görbéjét a minta / reagens - 1 / 12,5 arányával speciálisan előállított szérumalbumin oldatokkal állítottuk elő: 0,05; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9; 1,0, g / l a kalibrátor (50 g / l) 0,9% -os nátrium-klorid-oldattal történő hígításával (2. ábra).

2. ábra. A pirogallol piros módszer kalibrációs görbéje, a Fluitest USP reagens, Biocon Diagnostik (Németország), a minta / reagens arány 1 / 12,5.

Minden egyes fehérjeoldatból 80 μl-t vettünk, és 1,0 ml reagenssel kevertük; vizeletmintaként mérve.

Ábra. 3. A vizeletminták fehérjetartalmának mérésére használt eredmények összehasonlíthatóságának diagramja szulanaliszil és pirogallol módszerekkel.

Az Unimed A / O és a Biocon Diagnostik által előállított reagens kalibrációs görbéjét, 1/30 minta / reagens arányával, speciálisan előállított szérumalbumin oldatok alkalmazásával kaptuk: 0,05; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7; 0,8; 0,9; 1,0, 1,1; 1,2; 1,3; 1,4; 1,5; 1,6; 1,7; 1,75; 1,8; 1,85; 1,9; 2,0 g / l a kalibrátor (50 g / l) 0,9% -os nátrium-klorid-oldattal történő hígításával (4. ábra).

Ábra. 4. Kalibrációs görbék az Unimed A / O reagens (felső grafikon) és a Fluitest USP készlet Biocon Diagnostik-tól (alsó gráf) 1/30 minta / reagens arányával.

Minden egyes fehérjéből 50 μl-t vettünk, és 1,5 ml reagenssel összekevertük és vizeletmintákként mértük.

A vizsgálatban a pirogallol-módszer maximális érzékenységének elérése érdekében módosított, rendkívül érzékeny változata volt. Ehhez megnövekedett a hozzáadott vizelet térfogata. Mérési út: 1 ml fő reagenst adtunk minden csőhöz, majd 80 μl desztillált vizet (üres) adtunk az első csőhöz, 80 μl centrifugált vizeletet adtunk a maradék csövekhez, szobahőmérsékleten 10 percig inkubáltuk, és a minta optikai sűrűségét a vakpróbára mérjük. 600 nm hullámhossz és 650 nm-es differenciálszűrő

A vizeletben a fehérje koncentrációjának meghatározására szolgáló módszerek összehasonlítása céljából a páciensek vizeletének 60 mintáját szulfozicil és pirogallol módszerekkel mértük.

A fehérje mérési módszereinek érzékenységét a vizeletben a szérum albumint alacsony koncentrációjú (0–0,05 g / l) vizes oldatok vizsgálatával vizsgáltuk. A pirogallol és szulfosalicil módszerek esetében a nemspecifikus felszívódás értékeit is vizsgáltuk a vizeletminta színéből adódóan. Ehhez mértük a vizeletminták optikai sűrűségét, amelyben szulfosalicilsav vagy pirogallol reagens helyett ekvivalens mennyiségű sóoldatot adtunk hozzá.

A mátrix (vizelet) szulfosalicil-módszerre gyakorolt ​​hatásának értékeléséhez a következő kísérleteket végeztük.

1) A fehérjét nem tartalmazó vizeletmintákban a pirogallol és szulfosalicil módszerek (n = 43) szerint 0,4 g / l végkoncentrációban humán szérumalbumint adtunk. Ezután a fenti eljárások alkalmazásával meghatároztuk a fehérje koncentrációját az előállított mintákban.

2) A vizeletmintákat (n = 16), amely a pirogallol módszer szerint fehérjét tartalmaz, 0,9% -os nátrium-klorid-oldattal kétszer hígítottuk. A kapott mintákat szulfosalicil-módszerrel ismételten megvizsgáltuk, a fehérje-koncentrációt újraszámítottuk a hígításhoz.

Kutatási eredmények és vita

A specifikus albuminkoncentrációkat tartalmazó vizeletminták vizsgálata azt mutatta, hogy a minimális detektálható albumin koncentráció (módszerérzékenység) 0,033 g / l volt a szulfosalicil eljárásnál, és 0,012 g / l a pirogallol módszer esetében.

A vizeletminták fehérjetartalmának mérési eredményeinek összehasonlíthatóságának diagramjaként a szul-faliszicil (ordinát tengely) és a pirogallol (abszcissza tengely) módszerekkel végzett mérések eredményeit a 3. ábrán mutatjuk be. A gráf szilárd ferde vonala a mérési eredmények egyenlőségének felel meg két módszerrel. Ha mindkét módszer hasonló értékeket adott, akkor a gráf pontjait a szilárd vonalhoz kell sorolni. Az 1. ábrán látható adatok. A 3. ábrán azt is megjegyezzük, hogy a szulfosalicil-módszer a pirogallol-módszerhez viszonyítva következetesen alacsonyabb fehérje-koncentrációt mutatott az összes vizeletmintában.

Amint azt a vizsgálat kimutatta, a szulfosalicil és a pirogallol módszerekkel kapott eredmények között nincs meggyőző statisztikai kapcsolat. Ezen túlmenően a pirogallol módszerhez képest a vizeletminták 95% -ában a szulfosalicil-módszer alacsonyabb fehérje-koncentráció értékeket mutatott. Ugyanakkor az esetek 86% -ában a szulfosalicil-módszerrel végzett mérés két vagy több alkalommal alulbecsült eredményeket adott a pirogallol módszerhez képest.

Ugyanakkor a szulfosalicil-módszer egyes esetekben a fehérje jelenlétét a vizsgált vizelet sötét színe vagy fokozott zavarossága miatt a mintában jelenítette meg. Megállapítottuk, hogy 595 nm hullámhosszon a fehérje szulfosalicil-módszerrel (minta / reagens arány = 1/3) meghatározásakor a vizeletminta színe vagy zavarossága miatt az eredmény 0 és 0,477 g / l közötti (átlagos érték). 0,031 g / l). Ezért fel kell ismerni, hogy a szulfosalicil-módszer alkalmazásakor a kontroll minta (vizeletminta + sóoldat) alkalmazása minden vizeletmintához kötelező. A fehérje pirogallol módszerrel történő meghatározásakor a vizeletminta színének vagy zavarosságának mértéke nem befolyásolta az eredményt.

A mátrix (vizelet) hatásának vizsgálatára vonatkozó kísérlet azt mutatta, hogy szinte minden 0,4 g / l albumint tartalmazó, elkészített vizeletmintában a szulfo-szalicil módszerrel meghatározott koncentrációja átlagosan 0,4 g / l alatt volt 20% -kal (határértékek). fehérje koncentrációja 0,29-0,34 g / l). Ugyanakkor, amikor ezekben a mintákban a pirogallol módszerrel mérjük a fehérjekoncentrációt, az összes mintára vonatkozó eredmények 0,40-0,46 g / l tartományban voltak. Továbbá, amikor a mátrix (vizelet) hatását a fehérje koncentrációjának szulfosalicil módszerrel történő mérésére gyakorolják, megállapítottuk, hogy 16 dupla hígított vizeletmintából 5-ben a fehérje koncentrációja 15–33% -kal magasabb volt, mint a megfelelő hígítás nélküli mintákban. A mátrixnak a szulfosalicil-módszer eredményére gyakorolt ​​hatásának végső tisztázásához nagyszámú vizeletmintát kell vizsgálni.

A kapott adatok tehát a pirogallol-módszer előnyeit mutatják a szulfosalicil-módszerrel szemben, mivel az érzékenysége és az interferáló faktorok iránti érzékenysége nem érzékeny, nincs szükség üres vizeletmintára, lehetősége van egy kalibrációs görbe kialakítására szolgáló standard alkalmazására, és kis mennyiségű vizelet elemzésre. Az ilyen tulajdonságok megléte lehetővé teszi számunkra, hogy a pirogallol módszert ajánljuk a laboratóriumi gyakorlatban történő széleskörű alkalmazásra.

A kapott adatok alapján következtetést vonunk le: a vizeletben a fehérje koncentrációjának szulfosalicil módszerrel történő mérésének eredményei nem hasonlíthatók össze a pirogallol módszerrel kapott eredményekkel. Ez a tény a válasz arra a kérdésre, hogy miért nem használják a fejlett országok laboratóriumai a szulfosalicil-módszert. E módszer alkalmazása a fejletlen országokban nyilvánvalóan azzal magyarázható, hogy az ártényező az elért eredmények pontossága és diagnosztikai jelentősége felett van, és az 1. ábrán bemutatott számadatok alapján. 3 eredmény, mondható, és a józan ész. Kinek van szüksége ilyen elemzésre, ha a fehérje koncentrációja a vizeletben 0,3 g / l, a mérési eredmény 0,05-0,25 g / l lehet? Ami az ártényezőt illeti, akkor, amint tudod, a csaló kétszer fizet. Az elemzés hibás eredményei téves diagnózist és a beteg nem hatékony kezelését eredményezték. A szulfosalicil-módszer alkalmazásának fő veszélye, hogy jelentősen alábecsüljük az értékeket, és nem ritkán hiányzik a proteinuria. Ezért ez a módszer még szűrésre sem alkalmazható.

Szóval mit mérünk a szulfosalicil módszerrel? A módszer a turbidimetriás osztályba tartozik, a fényszórás (zavarosság) következtében a reakcióelegy fényáteresztésének (D D) változásának mérése alapján. A vizeletben lévő fehérje kimutatása esetén a következő folyamat következtében zavarosság keletkezik: a vizes fehérjék molekulái savas közegben denaturálódnak, egy kompakt gömbalakból laza „szálas” formába. Ugyanakkor a konglomerátum képződésének képessége a fehérjékben erőteljesen növekszik (kicsapási reakció). Az egyes fehérjemolekulák kisebbek, mint a látható fény hullámhossza, és ezért nagyon gyengén szétszórják. A szórási hatékonyság drámai módon nő, ha a kapott fehérjemolekulák konglomerátumainak mérete megközelíti a 0,6 μm értéket (a szondázó fény hullámhossza). Minél nagyobb a fehérje koncentrációja a vizeletben, annál nagyobb az ilyen konglomerátumok (szóróközpontok) száma. Azonban a fotométerrel mért D D optikai sűrűség és a vizeletben lévő fehérje koncentrációja közötti kapcsolat nagyon összetett. A reakció kezdeti szakaszában egy bizonyos mennyiségű kis fehérje-részecskék képződnek, majd nagyobb részecskékké ragadnak össze, míg a szórási központok koncentrációja csökken, és az egyes központok szóródásának hatékonysága (keresztmetszete) nő. A reakcióelegyben egy adott időpontban bizonyos számú, különböző méretű szóróközpont található. A vizeletben lévő fehérjék nagy koncentrációjában nagy fehérje-részecskéket képezhetnek, amelyek kicsapódnak, ami a reakcióelegy optikai sűrűségének csökkenéséhez vezet.

A fehérjék denaturálásának folyamata és a kicsapódás reakciója attól függ, hogy milyen közegben van jelen (pH, különböző sók koncentrációja). Az eljárás kalibrálásához humán albumin vizes oldatát 0,9% -os nátrium-klorid hozzáadásával alkalmazzuk. Amikor mérjük a vizeletben a fehérje koncentrációját, nem tudjuk, és nem veszik figyelembe sem a vizelet pH-ját, sem a só összetételét. Azt is figyelembe vesszük, hogy a különböző fehérjék különböző módon reagálnak a szulfosalicilsav oldatban. Ez magyarázza az 1. ábrán bemutatott mérési eredmények nagy szóródását. 3. Minél közelebb van a vizelet összetétele a kalibrátor összetételéhez, annál pontosabb a mérési eredmény. Az ilyen vizeletminták azonban nagyon kevések. A legtöbb esetben a vizelet összetétele olyan, hogy a mérési eredményeket alábecsülik, és gyakran igen jelentősek.

Ez utóbbit a fent leírt kísérlet igazolja, amelyben a fehérje koncentrációját szulfosalicil módszerrel mérjük hígítatlan és kétszer hígított vizeletmintákban. A kapott adatok összehasonlítása azt mutatta, hogy a vizelet hígítása (figyelembe véve a hígítási fokot) 15-33% -kal növeli a fehérjekoncentráció mérésének eredményeit. Ez a tény megerősíti a vizelet összetételének jelentős befolyását a fehérje koncentrációjának meghatározására (mátrixhatás).

Miért teszi lehetővé a pirogallol módszer a fehérje koncentrációjának a vizeletben történő mérésének pontosabb eredményeit? Először is, a vizeletminták hígítási reakciójának nagyobb aránya miatt. Ha a szulfosalicil-eljárásban a vizeletminták / reagensek aránya 1/3, akkor a pirogallol-módszerben a technika változata szerint 1 / 12,5 és 1/60 között lehet, ami jelentősen csökkenti a vizeletösszetétel hatását a mérési eredményre. Másodszor, a reakció szukcinát pufferben megy végbe, azaz stabil pH-n. Végül pedig a módszer alapelve, ha így mondható, átláthatóbb. A nátrium-molibdát és a pirogallol vörös festék egy fehérje molekulával alkotott komplexet képez. Ez azt eredményezi, hogy a festékmolekulák szabad állapotban nem vesznek fel 600 nm hullámhosszúságú fényt, fehérjével kombinálva, abszorbeálják a fényt. Úgy tűnik tehát, hogy minden fehérjemolekulát festékkel jelölünk, és ennek eredményeképpen azt tapasztaltuk, hogy a reakcióelegy optikai sűrűségének változása 600 nm hullámhosszon egyedülállóan kapcsolódik a vizeletben lévő fehérjekoncentrációhoz.

Következésképpen a vizeletben a fehérje meghatározására szolgáló szulfosalicil-módszer és a pirogallol-vörös festéket alkalmazó módszer között a legjelentősebb különbségek az 1. táblázatban találhatók.

Tab. 1. A fehérje fehérjék meghatározására szolgáló két módszer összehasonlító jellemzői (szulfozicil és pirogallol módszerek)

A vizelet fehérje meghatározása pirogallollal

A módszer alapelve a fehérjemolekulák és a pirogallol-vörös festékkomplex molekulái és a nátrium-molibdát (Pyrogallol Red-Molybdate komplex) kölcsönhatása által képződött színes komplex optikai sűrűségének fotometrikus mérése. Az oldat színintenzitása arányos a vizsgált anyag fehérjetartalmával. A detergensek jelenléte a reagensben egyenértékű definíciót biztosít a különböző természetű és szerkezetű fehérjék számára.

Reagensek. 1) 1,5 mmol / l pirogallol vörös (PGA) oldat: 60 mg PGA-t 100 ml metanolban oldunk. 0–5 ° C hőmérsékleten tárolandó; 2) 50 mmol / l szukcinát pufferoldat, pH 2,5: 5,9 g borostyánkősav (HOOC-CH2CH2-COOH); 0,14 g nátrium-oxalátot (Na2C2O4) és 0,5 g nátrium-benzoátot (C6H5A COONa-t 900 ml desztillált vízben oldjuk; 3) 10 mmol / l nátrium-molibdát-kristály-hidrát oldat (Na2MoO4 × 2H2O): 240 mg nátrium-molibdátot feloldunk 100 ml desztillált vízben; 4) Megmunkáló reagens: 900 ml szukcinát pufferoldathoz 40 ml PHC-oldatot és 4 ml nátrium-molibdát-oldatot adunk. Az oldat pH-ját 0,1 mol / l sósavoldattal (HCl) 2,5-re állítjuk, és térfogatát 1 literre állítjuk be. A reagens ebben a formában használatra kész, és sötét helyen, 2–25 ° C hőmérsékleten 6 hónapig stabil. 5) 0,5 g / l standard albumin oldat.

A meghatározás folyamata. A vizsgált vizeletbe 0,05 ml-t adunk az első kémcsőbe, 0,05 ml albumin standard oldatot adunk a második kémcsőhöz és 0,05 ml desztillált vizet a harmadik vizsgálati csőhöz (kontrollmintához), majd 3 ml munkaoldatot adunk a tesztcsövekhez. A csövek tartalmát összekeverjük, és 10 perc elteltével a mintát és a standardot 596 nm hullámhosszúságú kontrollmintával fotomettáljuk egy 10 mm-es optikai úthosszúságú küvettában.

A vizsgált vizeletmintában lévő fehérje koncentrációjának kiszámítását a következő képlet szerint végeztük:

ahol C a vizsgált vizeletminta fehérje koncentrációja, g / l; Astb és acikk- a vizsgált vizeletminta és a standard albumin oldat, g / l kihalása; 0,5 - standard albumin oldat koncentrációja, g / l.

  • az oldat színe (színkomplex) stabil egy órán keresztül;
  • a minta fehérje koncentrációja és az oldat felszívódása közötti közvetlen arányos kapcsolat a fotométer típusától függ;
  • ha a vizeletben a fehérjetartalom 3 g / l felett van, a mintát izotóniás nátrium-klorid-oldattal (9 g / l) hígítjuk, és a meghatározást megismételjük. A hígítás mértékét figyelembe veszik a fehérje koncentrációjának meghatározásakor.

Kezeljük a májat

Kezelés, tünetek, gyógyszerek

Pyrogallol vörös fehérje meghatározása a vizeletben

26.02.2009

Kurilyak O.A., Ph.D.

Általában a fehérje a vizelettel viszonylag kis mennyiségben, általában nem több, mint 100–150 mg / nap.

A napi diurézis egészséges emberben 1000-1500 ml / nap; így a fehérje koncentrációja fiziológiai körülmények között 8–10 mg / dl (0,08–0,1 g / l).

A teljes vizeletfehérjét három fő frakció képviseli: albumin, mucoproteinek és globulinok.

A vizelet albumin a szérumalbumin azon része, amelyet a glomerulusokban szűrtek, és amelyet a vese-tubulusokba nem reagáltak; az albumin normál kiválasztásában a vizeletben kevesebb, mint 30 mg / nap. A vizeletben egy másik fontos fehérjeforrás a vese-tubulusok, különösen a tubulusok disztális része. Ezek a tubulusok a húgyfehérje teljes mennyiségének kétharmadát választják ki; ebből az összegből körülbelül 50% -ot képvisel a Tamm-Horsfall glikoprotein, amelyet a disztális tubulusok epitheliuma választ ki és fontos szerepet játszik a húgyúti kövek kialakulásában. Más fehérjék kis mennyiségben vannak jelen a vizeletben, és a kis molekulatömegű plazmafehérjékből származnak, amelyek a vese-szűrőn keresztül szűrtek, és amelyek nem reagálnak a vese tubulusaiba, a vesetubulusok epitéliumából származó mikroglobulinokba, valamint a prosztata- és hüvelykisülésbe.

A proteinuria, vagyis a vizeletben lévő fehérjetartalom növekedése a vesekárosodást tükröző egyik legjelentősebb tünet. Ugyanakkor számos más állapot is előfordulhat proteinuria-val. Ezért a proteinuria két fő csoportja van: vese (igaz) és extrarenális (hamis) proteinuria.

Vese proteinuria esetén a fehérje közvetlenül a vérből jut a vizeletbe a glomeruláris szűrő permeabilitásának növekedése miatt. A renalis proteinuria gyakran megtalálható a glomerulonefritiszben, a nefrosisban, a pyelonefritiszben, a nefrosklerózisban, a vese amiloidózisban, a nefropátia különböző formáiban, például a terhes nők nefropátia, láz, magas vérnyomás stb. Az egészséges emberekben a fehérje a súlyos fizikai terhelés, hipotermia és pszichológiai stressz után is megtalálható. Újszülötteknél az élet első heteiben fiziológiás proteinuria figyelhető meg, és amikor gyermekekben és serdülőkben asténia fordul elő, az ortostatikus proteinuria (a test függőleges helyzetében) a 7 és 18 év közötti gyors növekedés mellett lehetséges.

Hamis (extrarenális) proteinuria esetén a vizeletben lévő fehérje forrás a leukociták, eritrociták, a húgyúti urothelia epiteliális sejtjeinek keveréke. Ezeknek az elemeknek a bomlása, különösen a lúgos vizelettel kifejezett, a fehérje vizeletbe való bejutásához vezet, ami már meghaladta a vese szűrőt. Különösen nagy hamis proteinuria ad a vérben a vizeletben, nagy hematuriaval, elérheti a 30 g / l és annál többet. Betegségek, amelyekhez extrarenális proteinuria - urolitiasis, vese-tuberkulózis, vese- vagy húgyúti daganatok, cystitis, pyelitis, prostatitis, urethritis, vulvovaginitis.

A klinikai besorolás magában foglalja az enyhe proteinúrát (kevesebb, mint 0,5 g / nap), mérsékelt (0,5-4 g / nap), vagy súlyos (több mint 4 g / nap).

A legtöbb vesebetegségben szenvedő beteg, például akut glomerulonefritisz vagy pyelonefritisz, mérsékelt proteinuria-t mutat, de a nefrotikus szindrómában szenvedő betegek általában több mint 4 g fehérjét választanak ki a vizeletben.

A fehérje mennyiségi meghatározásához számos módszert alkalmaznak, különösen az egységes Brandberg-Roberts-Stolnikov-módszert, a biuret-módszert, a szulfosalicilsav-módszert, a Coomassie kék festékkel, pirogallol vörös festékkel stb.

A fehérje fehérjék meghatározására szolgáló különböző módszerek alkalmazása komoly zavart okozott a vizeletben lévő fehérjetartalom normájának határértékeinek értelmezésében. Mivel a laboratóriumokban leggyakrabban 2 módszert alkalmaznak - a szulfosalicilsav és a pirogallol vörös festékkel, a normák határainak helyességének problémáját vesszük figyelembe. A szulfosalicil-módszer szempontjából a vizeletben a fehérjetartalom nem haladhatja meg a 0,03 g / l-t, a pirogallol szempontjából pedig 0,1 g / l! A különbségek háromszorosak.

A vizeletben lévő fehérjék normál koncentrációjának alacsony értékei a szulfosalicil használatakor a következő pontok miatt:

  • a kalibrációs görbe albumin vizes oldatán alapul. A vizelet összetétele nagyon különbözik a víztől: pH, só, kis molekulatömegű vegyületek (kreatinin, karbamid, stb.). Ennek eredményeként Altshuler, Rakov és Tkachev szerint a vizelet fehérje meghatározásának hibája 3-szor vagy több lehet! Ie a helyes eredményeket csak abban az esetben lehet elérni, ha a vizelet nagyon kis fajsúlyú és összetétele és pH-ja megközelíti a vizet;
  • a szulfosalicil-módszer nagyobb mértékű érzékenysége az albuminhoz képest más fehérjékhez képest (ekkor, amint azt fentebb említettük, az albumin normál vizeletmintákban nem haladja meg a teljes vizeletprotein 30% -át);
  • ha a vizelet pH-értéke az alkáli oldalra elmozdul, a szulfosalicilsav semlegesül, ami szintén csökkenti a fehérje-meghatározás eredményeit;
  • a kicsapódások szedimentációs sebessége jelentős eltéréseknek van kitéve - alacsony fehérjekoncentráció esetén a csapadék lelassul, és a reakció korai megszüntetése az eredmény alulbecsléséhez vezet;
  • a kicsapási reakció sebessége lényegében a reakcióelegy keverésétől függ. Magas fehérje koncentrációk esetén a cső erőteljes rázása nagy pelyhek kialakulásához és gyors csapadékképződéséhez vezethet.

Az eljárás összes fent felsorolt ​​jellemzője a vizeletben meghatározott fehérjekoncentráció jelentős alulbecsléséhez vezet. Az aluljelentés mértéke nagymértékben függ egy adott vizeletminta összetételétől. Mivel a szulfosalicilsav módszer alulbecsülte a fehérjekoncentráció értékét, a módszer normál határértéke is 0,03 g / l, ami körülbelül háromszor túl alacsony a klinikai laboratóriumi diagnosztikáról szóló külföldi referenciakönyvekben megadott adatokhoz képest.

A nyugati országokban működő laboratóriumok túlnyomó többsége elhagyta a szulfosalicil-módszer alkalmazását a vizeletben lévő fehérje koncentrációjának meghatározására, és erre a célra aktívan használja a pirogallol-módszert. A vizeletben és más biológiai folyadékokban a fehérje koncentrációjának meghatározására szolgáló pirogallol-módszer a fotometriai elv alapján mérhető egy színes komplex optikai sűrűsége, amelyet a fehérjemolekulák pirogallol vörös festékkel és nátrium-molibdát komplex molekulákkal (Pyrogallol Red - Molybdate komplex) való kölcsönhatása képez.

Miért teszi lehetővé a pirogallol módszer a fehérje koncentrációjának a vizeletben történő mérésének pontosabb eredményeit? Először is, a vizeletminták hígítási reakciójának nagyobb aránya miatt. Ha a szulfosalicil-eljárásban a vizeletminták / reagensek aránya 1/3, akkor a pirogallol-módszerben a technika változata szerint 1 / 12,5 és 1/60 között lehet, ami jelentősen csökkenti a vizeletösszetétel hatását a mérési eredményre. Másodszor, a reakció szukcinát pufferben megy végbe, azaz stabil pH-n. Végül pedig a módszer alapelve „átláthatóbb”. A nátrium-molibdát és a pirogallol vörös festék egy fehérje molekulával alkotott komplexet képez. Ez azt eredményezi, hogy a szabad állapotú festékmolekulák, amelyek nem vesznek fel fényt 600 nm hullámhosszon kombinálva egy fehérjével, elnyelik a fényt. Úgy tűnik tehát, hogy minden fehérjemolekulát festékkel jelölünk, és ennek eredményeképpen azt látjuk, hogy a reakcióelegy optikai sűrűségének változása 600 nm hullámhosszon egyértelműen korrelál a vizeletben lévő fehérjekoncentrációval. Továbbá, mivel a pirogallol piros és a különböző fehérje frakciók affinitása szinte azonos, az eljárás lehetővé teszi a teljes vizeletprotein meghatározását. Ezért a vizeletben a fehérje koncentráció normál értékének határértéke 0,1 g / l (minden modern nyugati iránymutatásban a klinikai és laboratóriumi diagnosztika, beleértve a laboratóriumi vizsgálatok klinikai kézikönyvét, szerkesztette: N. Tits). A vizeletfehérje meghatározására szolgáló pirogallol- és szulfosalicil-módszerek összehasonlító jellemzőit az 1. táblázatban mutatjuk be.

Végezetül szeretném ismét hangsúlyozni azt a tényt, hogy amikor a laboratórium a vizelet fehérjéből a szulfosalicil-módszerből a pirogallol-módszerre megy, a normál értékhatár jelentősen nő (0,03 g / l-ről 0,1 g / l-re). Ez a laboratóriumi személyzet minden bizonnyal értesíti az orvosokat, mert Ebben a helyzetben a proteinuria diagnózisa csak abban az esetben végezhető el, ha a vizeletben a fehérjetartalom meghaladja a 0,1 g / l-t.

3. A fehérje meghatározása.

A módszer alapelve a vizeletben lévő fehérje koagulációján alapuló nitrogén (vagy 20% -os szulfosalicilsav) jelenlétében.

A munka előrehaladása: 5 csepp vizelethez 1-2 csepp nitrogén (vagy szulfozicil) savat adunk. Fehérje jelenlétében a vizeletben zavarosságot mutat.

Táblázat. A vizelet patológiai komponenseinek kimutatása.

Megjegyzés: glükóz és fehérje jelenlétében a vizsgált vizeletben meghatározzuk a mennyiségi tartalmat.

A fehérje mennyiségi meghatározása a vizeletben a kolorimetriás módszerrel pirogallol vörös színnel.

A módszer alapelve: Amikor a fehérje kölcsönhatásba lép a pirogallol vörös és a nátrium-molibdát-tartalmával, egy színes komplex keletkezik, amely a színintenzitással arányos a mintában lévő fehérje koncentrációjával.

reagensek: Megmunkáló reagens - pirogallol piros oldat szukcinát pufferben, kalibráló fehérje oldat 0,50 g / l koncentrációban

A minták keverednek, tartsuk 10 percig. szobahőmérsékleten (18-25 ° C). Mérje meg az optikai sűrűséget (Dop) és kalibrációs minta (Dhogy) a kontroll mintával szemben λ = 598 (578-610) nm-en. A színezés 1 órán át stabil.

számítás: a fehérje koncentrációja a vizeletben (C) g / l a következő képlettel számítható: t

Normál értékek: 0,094 g / l-ig (0,141 g / nap)

A glükóz mennyiségi meghatározása a vizeletben a glükóz-oxidáz módszerrel.

A módszer alapelve: Ha a D-glükózt atmoszferikus oxigénnel oxidáljuk glükóz-oxidáz hatására, ekvimoláris mennyiségű hidrogén-peroxid képződik. A peroxidáz hatására a hidrogén-peroxid egy színezett termék képződésével oxidálja a kromogén szubsztrátokat (a fenol és a 4 aminoantipirin - 4ААP keveréke). A szín intenzitása arányos a glükóz tartalommal.

2 N2Oh2 + fenol + 4ААП színezett vegyület + 4Н2Oh

A munka előrehaladása: 1 ml oldatot és 0,5 ml foszfátpuffert vezetünk be két csőbe. 0,02 ml vizeletet adunk az első csőhöz, és a második kalibrátor 0,02 ml-ét adjuk hozzá (kalibrálás, glükóz standard oldat, 10 mmol / l). A mintákat összekeverjük, 15 percig inkubáljuk 37 ° C hőmérsékleten termosztátban, és az optikai sűrűséget kísérleti úton mérjük (Dop) és kalibrálás (Dhogy) a minták a munkareagenshez 500-546 nm hullámhosszon vannak.

A napi vizeletben lévő glükóz-tartalmat mmol / nap-ban határozzuk meg, ha a kapott mennyiséget a naponta összegyűjtött vizelet mennyiségével megszorozzuk.

Megjegyzés. Ha a vizeletben a cukortartalom több mint 1% -ot kell hígítani.

Jelenleg a biokémiai laboratóriumok egységes expressziós módszert alkalmaznak a glükóz vizeletének elemzésére reaktív glükóz teszt glükóz teszt alkalmazásával, vagy kombinált tesztcsíkok alkalmazásával a pH, fehérje, glükóz, keton testek és a vér számára. A vizsgálati csíkok vizelettel töltött edénybe 1 másodpercig merítettek. és hasonlítsa össze a skála színét.

Orvos Hepatitis

májkezelés

Normális fehérje vizelet pirogallol módszerrel

Egy egészséges ember napi 1,0-1,5 liter vizeletet termel. 8–10 mg / dl fehérje tartalma fiziológiai jelenség. A 100-150 mg-os vizeletben a fehérje napi bevitele nem okozhat gyanút. A globulin, a mucoprotein és az albumin a vizelet teljes fehérjét alkotja. A nagy albumin kiáramlás a vese szűrési folyamatának megsértését jelzi, és proteinuria vagy albuminuria.

A vizeletben lévő minden anyag "egészséges" arányt kap, és ha a fehérjeindex ingadozik, ez a vesék patológiáját jelezheti.

A vizeletvizsgálat magában foglalja az első (reggel) adagot, vagy napi mintát vesz. Ez utóbbi előnyösebb a proteinuria szintjének meghatározására, mivel a fehérjetartalom kifejezetten napi ingadozásokat mutat. A nap folyamán a vizeletet egy tartályba gyűjtik, mérjük a teljes térfogatot. A vizeletfehérje-elemzést végző laboratórium esetében a tartályból egy standard minta (50-100 ml) elegendő, a fennmaradó mennyiség nem szükséges. További információkért további vizsgálatot végeznek a Zimnitsky-n, ami azt mutatja, hogy a vizelet-indikátorok naponta normálisak.

Vissza a tartalomjegyzékhez

A vizeletben lévő fehérje normális felnőttnél nem haladhatja meg a 0,033 g / l-t. Ugyanakkor a napi sebesség nem haladja meg a 0,05 g / l-t. Terhes nők esetében a napi vizeletben a fehérjék aránya nagyobb - 0,3 g / l. És reggel a vizelet ugyanaz - 0,033 g / l. A fehérjék standardjai a vizelet és a gyermekek általános analízisében különböznek: a reggeli adag 0,036 g / l és naponta 0,06 g / l. A laboratóriumok leggyakrabban két módszert végeznek, amelyek azt mutatják, hogy mennyi fehérjefrakció van a vizeletben. A fenti normál értékek a szulfosalicilsavval végzett analízisre érvényesek. Ha pirogallol vörös festéket használtunk, az értékek háromszor eltérőek lesznek.

Vissza a tartalomjegyzékhez

A vizeletben lévő fehérje okai a vese patológiás folyamatai lehetnek:

  • a vese glomerulusok szűrése rosszul megy;
  • a fehérje tubulusokban való felszívódás károsodott;
  • Néhány betegség erős terhelést mutat a vesére - ha a vérben lévő fehérje megemelkedik, a veséknek egyszerűen nincs ideje a szűrésre.

A fennmaradó okokat nem veséknek tekintik. Így alakul ki a funkcionális albuminuria. A vizelet analízisében található fehérje allergiás reakciókban, epilepsziában, szívelégtelenségben, leukémiában, mérgezésben, mielómában, kemoterápiában, szisztémás betegségekben jelentkezik. A betegek elemzésében ez a mutató leggyakrabban a hipertóniás betegség első harangja.

A vizeletfehérje növekedése nem-kóros jellegű tényezőknek köszönhető, ezért további elemzésekre lesz szükség.

A kvantitatív módszerek a fehérje fehérjék meghatározására hibákat adnak, ezért ajánlatos több elemzést végezni, majd a megfelelő érték kiszámításához használja a képletet. A vizelet fehérje-tartalmát g / l vagy mg / l-ben mérjük. Ezek a fehérje indikátorok lehetővé teszik a proteinuria szintjének meghatározását, indokolást, a prognózis értékelését és a stratégia meghatározását.

Vissza a tartalomjegyzékhez

A test teljes működése érdekében a vér és a szövetek közötti állandó cserét igényli. Csak akkor lehetséges, ha a véredényekben bizonyos ozmotikus nyomás van. A vérplazmafehérjék csak akkor tartják fenn a nyomás szintjét, amikor az alacsony molekulatömegű anyagok könnyen áthaladnak a közegből a magas koncentrációjukkal az alacsonyabb koncentrációjú közegre. A fehérjemolekulák elvesztése a vérből az ágyából a vérbe jut, ami erős ödémával van tele. Ez a közepes és súlyos proteinuria megnyilvánulása.

Az albuminuria kezdeti szakaszai tünetmentesek. A beteg csak az alapbetegség megnyilvánulásait veszi figyelembe, ami a fehérje fehérje oka.

A fehérjék nyomon követését a fehérjék szintjének emelkedése nevezik a vizeletben bizonyos termékek felhasználása miatt

A vizeletet analízishez tiszta, sovány tartályban gyűjtjük. Mielőtt összegyűjti a WC-t, a perineum látható, szappannal és vízzel kell mosni. A nőknek ajánlott, hogy a hüvelyt egy darab pamut vagy tamponnal zárják le, hogy a hüvelykisülés ne befolyásolja az eredményt. Előestéjén jobb, ha nem iszik alkoholt, ásványvizet, kávét, fűszeres, sós és élelmiszert, amely színt ad a vizeletnek (fekete áfonya, cékla). Az erős fizikai erőfeszítés, a hosszú séták, a stressz, a láz és az izzadás, a fehérjetartalmú élelmiszerek vagy gyógyszerek túlzott fogyasztása a vizelet megadása előtt egy teljesen egészséges ember vizeletelemzésében a fehérje megjelenését váltja ki. Ezt a megengedett jelenséget fehérje-nyomvonalnak nevezzük.

Vissza a tartalomjegyzékhez

Vesebetegség, amely fehérjeveszteséghez vezet:

  • Amyloidosis. A vesékben lévő normál sejteket amiloidokkal (fehérje-szacharid komplex) cseréljük, ami megakadályozza a szervezet normális működését. A proteinurikus stádiumban az amiloidok a vese szöveteiben lerakódnak, elpusztítva a nefront, és ennek következtében a vese szűrőjét. Így a fehérje a vérből a vizeletbe jut. Ez a szakasz több mint 10 évig tarthat.
  • Diabetikus nefropátia. A szénhidrátok és a lipidek nem megfelelő anyagcsere következtében a vese vérei, glomerulusai és tubulusai megsemmisülnek. A vizeletben lévő fehérje az első jele annak, hogy a cukorbetegség várhatóan komplikált.
  • Gyulladásos eredetű betegségek - nephritis. Leggyakrabban a sérülések befolyásolják a vérerek, glomerulusok és pirelokalikális rendszereket, megzavarva a szűrőrendszer normális lefolyását.
  • A glomerulonefritisz legtöbb esetben autoimmun jellegű. A beteg panaszkodik a vizelet mennyiségének csökkenésére, az alsó hátfájásra és a nyomásnövekedésre. A glomerulonefritisz kezelésére az étrend, a kezelés és a gyógyszeres kezelés ajánlott.
  • Pyelonephritis. Az akut időszakban bakteriális fertőzés tünetei jelentkeznek: hidegrázás, hányinger, fejfájás. Ez fertőző betegség.
  • A policisztás vesebetegség.

Egy egészséges testben a fehérje molekulák (és meglehetősen nagy méretűek) nem tudnak átjutni a vesék szűrési rendszerén. Ezért a vizeletben lévő fehérje nem lehet. Ez a mutató mind a férfiak, mind a nők esetében azonos. Ha az elemzés proteinuria-t jelez, fontos, hogy orvoshoz forduljon. A szakértő megbecsüli, hogy mennyire emelkedik a fehérje szint, függetlenül attól, hogy van-e egyidejűleg a patológia, hogyan lehet helyreállítani a test normális működését. A statisztikák szerint a nőknél nagyobb az urogenitális betegség kockázata, mint a férfiaknál.

A módszer alapelve a vizeletben lévő fehérje koagulációján alapuló nitrogén (vagy 20% -os szulfosalicilsav) jelenlétében.

A munka előrehaladása: 5 csepp vizelethez 1-2 csepp nitrogén (vagy szulfozicil) savat adunk. Fehérje jelenlétében a vizeletben zavarosságot mutat.

Táblázat. A vizelet patológiai komponenseinek kimutatása.

Megjegyzés: glükóz és fehérje jelenlétében a vizsgált vizeletben meghatározzuk a mennyiségi tartalmat.

A módszer alapelve: Amikor a fehérje kölcsönhatásba lép a pirogallol vörös és a nátrium-molibdát-tartalmával, egy színes komplex keletkezik, amely a színintenzitással arányos a mintában lévő fehérje koncentrációjával.

reagensek: Megmunkáló reagens - pirogallol piros oldat szukcinát pufferben, kalibráló fehérje oldat 0,50 g / l koncentrációban

A minták keverednek, tartsuk 10 percig. szobahőmérsékleten (18-25 ° C). Mérjük meg a kísérleti (Dop) és a kalibrációs minta (Dk) optikai sűrűségét a kontroll mintával szemben λ = 598 (578-610) nm-en. A színezés 1 órán át stabil.

számítás: a fehérje koncentrációja a vizeletben (C) g / l a következő képlettel számítható: t

ahol: Dop = Dk = C = g / l.

Normál értékek: 0,094 g / l-ig (0,141 g / nap)

A módszer alapelve: Ha a D-glükózt atmoszferikus oxigénnel oxidáljuk glükóz-oxidáz hatására, ekvimoláris mennyiségű hidrogén-peroxid képződik. A peroxidáz hatására a hidrogén-peroxid egy színezett termék képződésével oxidálja a kromogén szubsztrátokat (a fenol és a 4 aminoantipirin - 4ААP keveréke). A szín intenzitása arányos a glükóz tartalommal.

Glükóz + O2 + H2O glükonolakton + H2O2

2H2O2 + fenol + 4AAP színezett vegyület + 4H2O

A munka előrehaladása: 1 ml oldatot és 0,5 ml foszfátpuffert vezetünk be két csőbe. 0,02 ml vizeletet adunk az első csőhöz, és a második kalibrátor 0,02 ml-ét adjuk hozzá (kalibrálás, glükóz standard oldat, 10 mmol / l). A mintákat összekeverjük, inkubáljuk 15 percig 37 ° C hőmérsékleten egy termosztátban, és a kísérleti (Dop) és kalibrációs (Dk) minták optikai sűrűségét a működő reagensre 500-546 nm hullámhosszon mérjük.

Számítás: C = Dop / Dk  10 mmol / l Dop = Dk =

A napi vizeletben lévő glükóz-tartalmat mmol / nap-ban határozzuk meg, ha a kapott mennyiséget a naponta összegyűjtött vizelet mennyiségével megszorozzuk.

Megjegyzés. Ha a vizeletben a cukortartalom több mint 1% -ot kell hígítani.

Jelenleg a biokémiai laboratóriumok egységes expressziós módszert alkalmaznak a glükóz vizeletének elemzésére reaktív glükóz teszt glükóz teszt alkalmazásával, vagy kombinált tesztcsíkok alkalmazásával a pH, fehérje, glükóz, keton testek és a vér számára. A vizsgálati csíkok vizelettel töltött edénybe 1 másodpercig merítettek. és hasonlítsa össze a skála színét.

A fehérje meghatározása pirogallol piros indikátorral

A módszer alapelve a fehérjemolekulák és a pirogallol-vörös festékkomplex molekulái és a nátrium-molibdát (Pyrogallol Red-Molybdate komplex) kölcsönhatása által képződött színes komplex optikai sűrűségének fotometrikus mérése. Az oldat színintenzitása arányos a vizsgált anyag fehérjetartalmával. A detergensek jelenléte a reagensben egyenértékű definíciót biztosít a különböző természetű és szerkezetű fehérjék számára.

Reagensek. 1) 1,5 mmol / l pirogallol vörös (PGA) oldat: 60 mg PGA-t 100 ml metanolban oldunk. 0–5 ° C hőmérsékleten tárolandó; 2) 50 mmol / l szukcinát pufferoldat, pH 2,5: 5,9 g borostyánkősavat (HOOC-CH2-CH2-COOH); 0,14 g nátrium-oxalátot (Na2C 2O 4) és 0,5 g nátrium-benzoátot (C6H5COONa) 900 ml desztillált vízben oldunk; 3) 10 mmol / l nátrium-molibdát kristályhidrát-oldat (Na2Mo04 × 2H2O): 240 mg nátrium-molibdátot feloldunk 100 ml desztillált vízben; 4) Megmunkáló reagens: 900 ml szukcinát pufferoldathoz 40 ml PHC-oldatot és 4 ml nátrium-molibdát-oldatot adunk. Az oldat pH-ját 0,1 mol / l sósavoldattal (HCl) 2,5-re állítjuk, és térfogatát 1 literre állítjuk be. A reagens ebben a formában használatra kész, és sötét helyen, 2–25 ° C hőmérsékleten 6 hónapig stabil. 5) 0,5 g / l standard albumin oldat.

A meghatározás folyamata. A vizsgált vizeletbe 0,05 ml-t adunk az első kémcsőbe, 0,05 ml albumin standard oldatot adunk a második kémcsőhöz és 0,05 ml desztillált vizet a harmadik vizsgálati csőhöz (kontrollmintához), majd 3 ml munkaoldatot adunk a tesztcsövekhez. A csövek tartalmát összekeverjük, és 10 perc elteltével a mintát és a standardot 596 nm hullámhosszúságú kontrollmintával fotomettáljuk egy 10 mm-es optikai úthosszúságú küvettában.

A vizsgált vizeletmintában lévő fehérje koncentrációjának kiszámítását a következő képlet szerint végeztük:

C = 0,5 × Apr / Ast,

ahol C a vizsgált vizeletminta fehérje koncentrációja, g / l; Apr és Ast - a vizsgált vizeletminta és a standard albumin oldat kioltása, g / l; 0,5 - standard albumin oldat koncentrációja, g / l.

  • az oldat színe (színkomplex) stabil egy órán keresztül;
  • a minta fehérje koncentrációja és az oldat felszívódása közötti közvetlen arányos kapcsolat a fotométer típusától függ;
  • ha a vizeletben a fehérjetartalom 3 g / l felett van, a mintát izotóniás nátrium-klorid-oldattal (9 g / l) hígítjuk, és a meghatározást megismételjük. A hígítás mértékét figyelembe veszik a fehérje koncentrációjának meghatározásakor.
  • A vizelet fehérje meghatározása
  • Egységes szulfozicilsav-próba
  • Az egységes Brandberg - Roberts - Stolnikov módszer
  • A vizeletben lévő fehérje mennyiségének meghatározása szulfosalicilsavval való reakcióval
  • Biuret módszer
  • Bens - Jones fehérje kimutatása a vizeletben

A proteinuria olyan jelenség, amelyben a fehérje kimutatható a vizeletben, ami a vesekárosodás lehetőségét jelzi, és a szív, a vér és a nyirokbetegségek kialakulásának tényezője.

A fehérje kimutatása a vizeletben nem mindig jelzi a betegséget. Hasonló jelenség jellemző az egészen egészséges emberek esetében is, akiknél a vizelet fehérje kimutatható. A hipotermia, a fizikai terhelés, a fehérjetartalmú élelmiszerek fogyasztása a fehérje megjelenéséhez vezet a vizeletben, ami kezelés nélkül eltűnik.

A szűrés időpontjában a gyakorlatilag egészséges emberek 17% -a határozza meg a fehérjét, de csak 2% -a pozitív eredményt mutat a vesebetegség jele.

A fehérje molekulák nem léphetnek be a vérbe. A test számára létfontosságúak - a sejtek építőanyagai, részt vesznek a koenzimek, hormonok, antitestek reakcióiban. A férfiak és a nők esetében a fehérje teljes hiánya a vizeletben.

A fehérje molekulák elvesztésének megakadályozását a vesék végzik.

A vizelet szűrésében két vese rendszer van:

  1. glomerulusok - ne engedjék be nagy molekulákba, de ne tartsák fenn az albumint, a globulint - a fehérje molekulák egy kis részét;
  2. vese-tubulusok - az adszorbeált fehérjék szűrt glomerulusok, visszatérnek a keringési rendszerbe.

Albumint (kb. 49%), mucoproteineket, globulint találtak a vizeletben, amelyekből az immunglobulinok aránya körülbelül 20%.

Globulinek - nagy molekulatömegű savófehérjék, amelyeket az immunrendszerben és a májban termelnek. Legtöbbjüket az immunrendszer szintetizálja, immunglobulinokra vagy antitestekre utal.

Az albuminok olyan fehérjék egy töredéke, amelyek először a vizeletben jelentkeznek, még ha kisebb vesekárosodás is van. Van egy bizonyos mennyiségű albumin az egészséges vizeletben, de annyira jelentéktelen, hogy laboratóriumi diagnosztikával nem lehet kimutatni.

A laboratóriumi diagnosztikával kimutatható alsó küszöbérték 0,033 g / l. Ha több mint 150 mg fehérje elveszik naponta, akkor proteinuriaról beszélnek.

Alapadatok a vizeletből

Az enyhe proteinuria betegség tünetmentes. Vizuálisan a fehérje-mentes vizeletet nem lehet megkülönböztetni a vizeletről, amelyben kis mennyiségű fehérje van. A kissé habos vizelet már nagyfokú proteinuriaval rendelkezik.

Lehetséges feltételezni, hogy a fehérje a vizeletben aktívan kiválasztódik, ha a beteg csak mérsékelt vagy súlyos mértékű betegséggel jelentkezik, a végtagok, az arc, a hasi ödéma megjelenése miatt.

A betegség korai szakaszában a proteinuria közvetett jelei lehetnek:

  • vizelet elszíneződése;
  • növekvő gyengeség;
  • étvágytalanság;
  • hányinger, hányás;
  • csontfájdalom;
  • álmosság, szédülés;
  • magas hőmérséklet.

Az ilyen jelek megjelenését nem lehet figyelmen kívül hagyni, különösen a terhesség alatt. Ez enyhe eltérést jelenthet a normától, és előfordulhat a preeclampsia, preeclampsia kialakulásának tünete.

A fehérje elvesztésének számszerűsítése nem könnyű feladat, a beteg állapotának teljesebb képének elérése érdekében több laboratóriumi vizsgálatot alkalmaznak.

A vizeletben a felesleges fehérje kimutatására szolgáló módszer kiválasztásának nehézségeit a következők magyarázzák:

  • alacsony fehérjekoncentráció, amelynél az elismerés nagy pontosságú eszközöket igényel;
  • A vizelet összetétele megnehezíti a feladatot, mivel olyan anyagokat tartalmaz, amelyek torzítják az eredményt.

A legnagyobb információt a vizelet első reggel adagjának elemzése adja, amelyet az ébredés után gyűjtöttünk össze.

Az elemzés előestéjén az alábbi feltételeket kell teljesíteni:

  • Nem enni fűszeres, sült, fehérjetartalmú ételek, alkohol;
  • a diuretikumot 48 órán át kizárni;
  • korlátozza a fizikai aktivitást;
  • gondosan kövesse a személyes higiéniai szabályokat.

A reggeli vizelet a leginkább informatív, mivel a húgyhólyagban hosszú távú, kevésbé függ a táplálékfelvételtől.

A vizeletben lévő fehérje mennyisége véletlenszerűen elemezhető, amely bármikor megtörténik, de ez az elemzés kevésbé informatív, annál nagyobb a hiba valószínűsége.

A napi fehérjeveszteség számszerűsítése érdekében a teljes napi vizelet elemzése történik. Ehhez 24 órán belül egy speciális műanyag tartályban gyűjtöttük össze a napra kijelölt vizeletet. A gyűjtés bármikor megkezdhető. A fő feltétel - pontosan a gyűjtés napja.

A proteinuria minőségi meghatározása a fehérje fizikai vagy kémiai tényezőkkel történő denaturálásán alapul. A kvalitatív módszerek a szűréshez kapcsolódnak, amely lehetővé teszi a fehérje jelenlétének megállapítását a vizeletben, de nem ad lehetőséget arra, hogy pontosan értékeljük a proteinuria mértékét.

Használt minták:

  • Forralással;
  • szulfosalicilsav;
  • salétromsav, Larionic reagens a Heller gyűrű mintáján.

A szulfosalicilsavval ellátott mintát úgy végezzük, hogy összehasonlítjuk a kontroll vizeletmintát egy tapasztaltával, amelyben 7-8 csepp 20% -os szulfosalicilsavat adunk a vizelethez. A fehérje jelenlétére vonatkozó következtetés az opaleszkáló zavarosság intenzitása alapján történik, amely a reakció során a kémcsőben jelenik meg.

Gyakran használt Geller teszt 50% -os salétromsav alkalmazásával. A módszer érzékenysége 0,033 g / l. Ha a kísérlet kezdete után 2-3 perccel a vizsgálati csőben, a vizeletmintával és a reagenssel ellátott fehérje ilyen koncentrációja fehér szál gyűrű jelenik meg, amelynek képződése jelzi a fehérje jelenlétét.

A fél-kvantitatív módszerek a következők:

  • eljárás a fehérje meghatározására vizelet tesztcsíkokban;
  • Brandberg-Roberts-Stolnikov módszer.

A Brandberg-Roberts-Stolnikov módszer szerinti meghatározási módszer a Geller gyűrű módszerén alapul, de lehetővé teszi a fehérje mennyiségének pontosabb becslését. Ezzel a módszerrel végzett vizsgálat során a vizelet több hígítása elérheti a szálszerű fehérje gyűrű megjelenését a teszt kezdetétől számított 2-3 perces időintervallumban.

A gyakorlatban a tesztcsík módszerét alkalmazzuk az alkalmazott festék brómfenol kék mintájára. A tesztcsíkok hátránya az albuminnal szembeni szelektív érzékenység, ami a globulinok vagy más fehérjék vizeletkoncentrációjának növekedése esetén az eredmény torzulásához vezet.

A módszer hátrányai a teszt viszonylag alacsony érzékenysége a fehérjére nézve is. A tesztcsíkok a fehérje jelenlétére reagálnak a vizeletben, a fehérje koncentrációja nagyobb, mint 0,15 g / l.

A mennyiségi értékelési módszerek feltételesen oszthatók meg:

A módszerek a fehérjék tulajdonságán alapulnak, hogy a kötőanyag hatására csökkentsék az oldhatóságot egy rosszul oldódó vegyület képződésével.

A proteinkötést okozó szerek lehetnek:

  • szulfosalicilsav;
  • triklór-ecetsav;
  • benzetónium-klorid.

A vizsgálatok eredményei alapján következtetéseket vonunk le a mintában levő fényáram csillapításának mértékéről a szuszpenzióval összehasonlítva a kontrollhoz képest. Ennek a módszernek az eredményeit nem mindig lehet megbízhatónak tekinteni, mivel a reakciókörülmények, a hőmérséklet, a tápközeg savasságának sebessége különbözik.

A megelőző napon a gyógyszerek bevitelének értékelésére gyakorolt ​​hatást, mielőtt elvégeznénk az ilyen módszerekkel végzett vizsgálatokat, nem lehet:

  • antibiotikumok;
  • szulfonamidok;
  • jódtartalmú gyógyszerek.

A módszer az elérhető áron érhető el, amely lehetővé teszi, hogy széles körben használják a szűréshez. A pontosabb eredményeket azonban drágább kolorimetriás módszerekkel lehet elérni.

A vizeletben lévő fehérje koncentrációját pontosan meghatározó érzékeny módszerek a kolorimetriás módszerek.

Ezt nagy pontossággal teheti meg:

  • biuret reakció;
  • technika Lowry;
  • Színező technikák, amelyek olyan festékeket használnak, amelyek vizeletfehérjékkel komplexeket képeznek, amelyek vizuálisan eltérnek a mintától.

A vizeletben lévő fehérje kimutatására szolgáló kolorimetriás módszerek

A módszer megbízható, rendkívül érzékeny, amely lehetővé teszi a vizelet albuminban, globulinokban, paraproteinekben történő meghatározást. Ez a fő módszer a vitatott vizsgálati eredmények tisztázására, valamint a kórházak nefrológiai osztályaival rendelkező betegek napi vizeletfehérje tisztázására.

Még pontosabb eredményeket érhetünk el a Lowry módszerrel, amely a biuret reakción alapul, valamint a Folin reakció, amely felismeri a triptofánt és a tirozint a fehérje molekulákban.

A lehetséges hibák kiküszöbölése érdekében a vizeletmintát aminosavakból, húgysavból történő dialízissel tisztítjuk. A szalicilátok, tetraciklinek, klórpromazin használatakor a hibák lehetségesek.

A fehérje meghatározására a legpontosabb módszer annak tulajdonságán alapul, hogy kötődjön a használt festékekhez:

  • Ponceau;
  • Coomassie ragyogó kék;
  • pirogallic piros.

A nap folyamán a vizeletben kiválasztódó fehérje mennyisége változó. Ahhoz, hogy objektívebben értékeljük a vizeletben a fehérje elvesztését, vezessük be a napi fehérje fogalmát a vizeletben. Ezt az értéket g / nap értékben mérjük.

A vizeletben lévő napi fehérje gyors értékeléséhez a fehérje és a kreatinin mennyiségét a vizelet egyetlen részében határozzuk meg, majd a fehérje / kreatinin arányt a fehérje vesztesége alapján határozzuk meg.

A módszer azon a tényen alapul, hogy a vizelet kreatinin kiválasztása állandó, nem változik a nap folyamán. Egy egészséges embernél a fehérje: kreatinin normális aránya a vizeletben 0,2.

Ez a módszer kiküszöböli a napi vizelet összegyűjtésekor esetlegesen előforduló hibákat.

A kvalitatív tesztek a kvantitatív vizsgálatoknál gyakrabban adnak hamis pozitív vagy hamis negatív eredményeket. Az elemzés előestéjén a gyógyszerekkel, az étrend-szokásokkal, a fizikai aktivitással kapcsolatos hibák merülnek fel.

Ennek a kvalitatív vizsgálatnak a dekódolását a kémcsőben lévő zavarosság vizuális értékelésével adjuk meg a vizsgálati eredmény és a kontroll közötti összehasonlítással:

  1. a gyenge pozitív reakció becslése +;
  2. pozitív ++;
  3. élesen pozitív +++.

A Geller gyűrűvizsgálat pontosabban értékeli a fehérje jelenlétét a vizeletben, de nem teszi lehetővé a fehérje kvantitatív meghatározását a vizeletben. A szulfosalicilsav-teszthez hasonlóan a Geller-teszt csak hozzávetőleges képet ad a vizelet-fehérjetartalomról.

A módszer lehetővé teszi a proteinuria mértékének kvantitatív, de túl időigényes, pontatlan értékelését, mivel erős hígítással csökken az értékelés pontossága.

A fehérje kiszámításához meg kell szorozni a vizelet hígítási fokát 0, 033 g / l:

A teszt nem igényel különleges feltételeket, ezt az eljárást otthon kell elvégezni. Ehhez a tesztcsíkot 2 percig le kell engedni a vizeletbe.

Az eredményeket a szalagon lévő pluszok számával fejezzük ki, amelynek dekódolása a táblázatban található:

  1. A 30 mg / 100 ml-ig terjedő értékeknek megfelelő vizsgálati eredmények megfelelnek a fiziológiai proteinurianak.
  2. Az 1+ és 2 ++ tesztcsíkok értékei jelentős proteinuria-t jelentenek.
  3. A 3 +++, 4 ++++ értékeket a vesebetegségek okozta kóros proteinuria jelzi.

A tesztcsíkok csak nagyjából meghatározhatják a megnövekedett fehérjét a vizeletben. Ezeket nem használják a pontos diagnosztikához, és még inkább nem tudják megmondani, hogy mit jelent.

Ne hagyja, hogy a tesztcsíkok megfelelően értékeljék a vizeletben lévő fehérje mennyiségét terhes nőknél. Egy megbízhatóbb módszer a fehérje meghatározása a napi vizeletben.

A vizelet fehérje meghatározása tesztcsíkok felhasználásával:

A vizeletben lévő napi fehérje pontosabb diagnózisa a vesék funkcionális állapotának értékelésének. Ehhez naponta be kell gyűjteni a vese által kiválasztott vizeletet.

A vizeletben lévő fehérjetartalom a fehérje: kreatinin aránya alapján található, az adatok a táblázatban láthatók:

A fehérje / kreatinin arány érvényes értékei a táblázatban szereplő adatok:

A több mint 3,5 g fehérje napi elvesztésével az állapot masszív proteinurusznak nevezhető.

Ha a vizeletben sok fehérje van, 1 hónap után, majd 3 hónap elteltével, az eredmények alapján szükség van az ismételt vizsgálatra, amely megállapítja, hogy miért túllépik a normát.

A megnövekedett fehérjék okai a vizeletben a szervezetben a megnövekedett termelés és a vesék megsértése, a proteinuria megkülönböztetése:

  • a fiziológiai - kisebb eltéréseket a normától a fiziológiai folyamatok okozzák, spontán módon oldódnak meg;
  • kóros - a vesékben vagy a szervezet más szerveiben bekövetkező kóros folyamat eredményeként a változások a kezelés nélkül haladnak.

A fehérje táplálkozásának, mechanikai égési sérüléseinek, sérüléseinek enyhe növekedése megfigyelhető az immunoglobulinok fokozott termelésével.

Enyhe proteinuria okozhat fizikai terhelés, pszicho-érzelmi stressz vagy bizonyos gyógyszerek alkalmazása.

A fiziológiás proteinuria a gyermekekben a vizelet fehérje növekedése a születés utáni első napokban. De egy hetes élet után a gyermek vizeletben lévő fehérjetartalma a normától való eltérésnek tekinthető, és fejlődő patológiát jelez.

A vesebetegség, a fertőző betegségek néha a fehérjék megjelenésével járnak együtt a vizeletben.

Az ilyen állapotok általában enyhe proteinurusznak felelnek meg, átmeneti jelenségek, gyorsan áthaladnak, különös bánásmód nélkül.

Súlyosabb körülmények, súlyos proteinuria észlelhető a következő esetekben:

  • glomerulonephritis;
  • diabétesz;
  • szívbetegség;
  • húgyhólyagrák;
  • multiplex myeloma;
  • fertőzés, gyógyszerkárosodás, policisztás vesebetegség;
  • magas vérnyomás;
  • szisztémás lupus erythematosus;
  • Goodpasture-szindróma.

A bélelzáródás, a szívelégtelenség és a hyperthyreosis okozhat fehérje nyomokat a vizeletben.

A proteinuria fajtái többféleképpen vannak besorolva. A fehérjék minőségi értékeléséhez használhatjuk a Yaroshevsky-osztályozást.

A jaroshevszkij 1971-ben létrehozott szisztematikája szerint a proteinuria megkülönböztethető:

  1. vese - amely magában foglalja a glomeruláris szűrés megsértését, a tubulusok fehérje felszabadulását, a fehérjék újrabszorpciójának hiányát a tubulusokban;
  2. prerenal - a veséken kívül történik, a hemoglobin kiválasztása, a többszörös mielóma következtében a vérben felesleges fehérjék;
  3. A mellékvese - a vizeletüreg helyén jelentkezik a vesék után, a fehérje kiválasztása a vizeletszervek megsemmisítésében.

A kvantitatív értékeléshez, hogy mi történik, feltétlenül izolálódnak a proteinuria fokozatok. Emlékeztetni kell arra, hogy a kezelés nélkül könnyen át tudnak jutni egy nehezebbre.

A proteinuria legsúlyosabb stádiuma több mint 3 g fehérje napi elvesztésével alakul ki. A napi 30 mg-tól 300 mg-ig terjedő fehérjeveszteség a mérsékelt stádium vagy a mikroalbumuria. A napi vizeletben legfeljebb 30 mg fehérje enyhe proteinuria.

A fehérje normája a vizeletben mennyi?

    A vizeletben lévő normál fehérje gyakorlatilag hiányzik (kevesebb, mint 0,002 g / l). Bizonyos körülmények között azonban az egészséges egyének kis mennyiségű fehérje jelenhet meg a vizeletben nagy mennyiségű fehérjetartalmú élelmiszerek lenyelése után, az érzelmi stresszel, a hosszantartó fizikai terheléssel (az ún. Menetelő proteinuria) történő hűtés következtében.

Egy jelentős mennyiségű fehérje megjelenése a vizeletben (proteinuria) patológia. A proteinuria okozója lehet vesebetegség (akut és krónikus glomerulonefritisz, pirelonefrit, terhes nefropátia stb.) Vagy húgyúti (húgyhólyaggyulladás, prosztata, húgycső). A renális proteinuria lehet szerves (glomeruláris, tubuláris és felesleges) és funkcionális (lázas proteinuria, ortosztatikus serdülőknél, amikor a csecsemőket túladagolják, újszülötteknél). A funkcionális proteinuria nem kapcsolódik a vese patológiához. A napi fehérje mennyiség 0,1 és 3,0 g közötti vagy annál nagyobb. A vizeletfehérjék összetételét elektroforézissel határozzuk meg. A Bens-Jones fehérje megjelenése a vizeletben a myeloma és a Waldenstrom macroglobulinemia, # 223; 2 mikroglobulinra jellemző a vese-tubulusok károsodása esetén.

  • A vizeletben lévő normál fehérje gyakorlatilag hiányzik (kevesebb, mint 0,002 g / l).
  • A vizelet vizsgálatában feltárt betegség főbb jelei.

    SG fajsúly. A fajlagos tömeg csökkenése azt mutatja, hogy csökken a vese képessége a vizelet koncentrálására és a toxinok kiválasztódására a szervezetből, mint a veseelégtelenség esetében. A fajlagos tömeg növekedése nagy mennyiségű cukorhoz kapcsolódik a vizeletben, sókban. Meg kell jegyezni, hogy csak egy vizeletvizsgálatra lehetetlen értékelni a fajsúlyt, véletlenszerű változások történhetnek, 1-2 alkalommal szükséges a vizeletvizsgálat újra elvégzése.

    Fehérje fehérje a vizeletben - proteinuria. A proteinuria okozza a vesék károsodását a nefritiszben, az amiloidózisban és a mérgek által okozott károsodásban. A vizeletben lévő fehérje a húgyúti betegségek (pyelonefritisz, cystitis, prostatitis) miatt is megjelenhet.

    Glükóz glükóz (cukor) a vizeletben - glikozuria - leggyakrabban a cukorbetegség miatt. Ritkább ok a vese-tubulusok veresége. Nagyon zavaró, ha a ketontesteket a vizeletben cukorval együtt észlelik. Ez súlyos, rosszul beállított cukorbetegség esetén fordul elő, és a cukorbetegség legsúlyosabb szövődményeinek - diabéteszes kómának - a jele.

    A bilirubint, az Urobilinogen bilirubint és az urobilint a vizeletben különböző sárgasági formákban határozzuk meg.

    Eritrociták Eritrociták vizeletben - hematuria. Ez vagy a vesék magának a vereségével, leggyakrabban gyulladással, vagy a húgyúti betegségekben szenvedő betegekkel történik. Ha például egy kő mozog velük, megrongálhatja a nyálkahártyát, vörösvérsejtek lesznek a vizeletben. A bomló vesetumor is hematuriahoz vezethet.

    Leukociták Leukociták a vizeletben - leukocyturia, leggyakrabban a húgyutak gyulladásos változásainak következménye a pirelonefritisz, cystitis betegeknél. A leukocitákat gyakran a női külső nemi szervek gyulladása határozza meg, a férfiaknál a prosztata gyulladása.

    Cylindrs A hengerek sajátos mikroszkópos szerkezetek. A hialinhengerek 1-2-es mennyiségben lehetnek egészséges emberekben. A veseműködőkben képződnek, fehérje részecskék össze vannak kötve. De a számuk növekedése, más típusú palackok (szemcsés, eritrocita, zsír) mindig jelzik magának a veseszövetnek a károsodását. A vesék gyulladásos betegségei, az anyagcsere-elváltozások, például a cukorbetegség hengerek.

    Informatív módszer és korlátai. A vese specifikus betegségeinek felismerésére szolgáló általános vizeletvizsgálat információtartalma alacsony, általában további, pontosabb vizsgálatokat igényel. A kutatás azonban nagyon fontos, különösen a megelőző vizsgálatok során, mivel lehetővé teszi a vesebetegség korai jeleinek azonosítását. Ismert, hogy gyakran vesebetegség rejtőzik, és csak a vizeletvizsgálat lehetővé teszi számukra, hogy gyanítsák és folytassák a további szükséges vizsgálatokat.

    A legtöbb laboratóriumban a fehérje vizeletének vizsgálatakor először olyan kvalitatív reakciókat használjon, amelyek nem érzékelik a fehérjét a egészséges vizeletben. Ha a vizeletben lévő fehérjét minőségi reakciókkal észlelik, kvantitatív (vagy fél-kvantitatív) meghatározást végzünk. Ugyanakkor fontos az uroproteinek különböző spektrumát lefedő alkalmazott módszerek jellemzői. Így a fehérje 3% -os szulfosalicilsavval történő meghatározásakor a fehérje mennyisége 0,03 g / l értékig normálisnak tekinthető, míg a pirogallol módszer alkalmazásakor a normál fehérjék értéke 0,1 g / l-re emelkedik. Ebben a tekintetben az elemzési formában meg kell jelölni a fehérje normál értékét a laboratórium által alkalmazott módszerhez.

    A fehérje minimális mennyiségének meghatározásakor ajánlatos az elemzést megismételni, kétség esetén meg kell határozni a vizeletben lévő fehérjeveszteséget. A normál napi vizelet kis mennyiségben tartalmaz fehérjét. Fiziológiás körülmények között a szűrt fehérje majdnem teljesen újrabefolyódik a proximális tubulusok epitheliumában, és a napi mennyiségben a vizelet mennyisége a szerzőktől függően 2050, 80 100 mg és akár 150 200 mg között változik. Egyes szerzők úgy vélik, hogy a napi fehérjemennyiség 30 50 mg / nap a felnőtt élettani normája. Mások úgy vélik, hogy a vizelet fehérje kiválasztása nem haladhatja meg a 60 mg / m2 testfelületet naponta, kivéve az élet első hónapját, amikor a fiziológiai proteinuria értéke négyszerese lehet a megadott értéknél.

    Az egészséges személy vizeletében a fehérjék megjelenésének általános feltétele a vér magas koncentrációja és a molekulatömege legfeljebb 100 200 kDa.

  • ez nem a szokás, a diagnózissal lehetséges, egy másik dolog az, hogy a nefrotikus szindróma esetében valójában egy kis indikátor.. nézd meg a klinikát - duzzanat, nyomás, stb., folytassa az előírt kezelést.
  • és mégis azt mondom: ez normális NEM!